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ATP依賴性DNA連接酶Ⅰ(LIG1)重組蛋白人蛋白表達(dá)及純化

瀏覽次數(shù):893發(fā)布日期:2023-03-16

ATP依賴性DNA連接酶Ⅰ(LIG1)重組蛋白人蛋白表達(dá)及純化:


1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。


2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。


3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。


4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。


5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。


交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

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