它的原理是通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)在線(xiàn)監(jiān)控反應(yīng)過(guò)程，結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析，計(jì)算待測(cè)樣品模板的初始濃度。

　　過(guò)去，我國(guó)熒光檢測(cè)試劑普遍采用的是定性的檢測(cè)方法，即通過(guò)對(duì)人體內(nèi)抗原、抗體的檢測(cè)來(lái)判斷是否感染了病毒。但遭受病毒感染后，病毒要在體內(nèi)潛伏一定時(shí)間，人體才會(huì)產(chǎn)生抗體。這段時(shí)間就是“窗口期”，而且定性檢驗(yàn)所能報(bào)告的只是感染或未感染，卻無(wú)法報(bào)告感染者體內(nèi)病毒的數(shù)量。

　　實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒克服了上述不足，檢驗(yàn)時(shí)通過(guò)基因擴(kuò)增的方法（即PCR）將病毒等成百倍地放大，采用熒光顯示儀，可以清晰準(zhǔn)確地觀察到病毒的數(shù)量。而且，它所檢測(cè)的是病毒本身而不是人體內(nèi)的抗原或抗體，所以一旦病毒進(jìn)入人體就可能被檢測(cè)出來(lái)，使“窗口期”發(fā)現(xiàn)病毒感染者成為可能。

　　這種試劑盒主要用于各型肝炎、艾滋病、禽流感、結(jié)核、性病等傳染病診斷和療效評(píng)價(jià)；地中海貧血、血友病、性別發(fā)育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)；腫瘤標(biāo)志物及瘤基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)腫瘤病診斷；遺傳基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)遺傳病診斷等。

　　實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒的出現(xiàn)，簡(jiǎn)化了定量檢測(cè)的過(guò)程，而且真正實(shí)現(xiàn)了定量。多種檢測(cè)系統(tǒng)的出現(xiàn)，使實(shí)驗(yàn)的選擇性更強(qiáng)。自動(dòng)化操作提高了工作效率，反應(yīng)快速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異性強(qiáng)、結(jié)果清晰。隨著生物芯片技術(shù)和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合，熒光定量PCR在醫(yī)學(xué)檢測(cè)及其他各個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用前景將更加廣闊。