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植物elisa試劑盒使用注意事項(xiàng)

瀏覽次數(shù):562發(fā)布日期:2022-04-20
  植物elisa試劑盒在利用液氮充分磨碎植物組織的同時(shí),采用特殊的試劑對(duì)植物細(xì)胞釋放出來的蛋白進(jìn)行沉淀,并使用廣譜蛋白酶抑制劑抑制蛋白酶活性,大程度地保持所抽提蛋白質(zhì)的完整性。而且蛋白抽提物呈干粉狀,有利于蛋白質(zhì)的長(zhǎng)期穩(wěn)定保存。提取的蛋白,包括膜蛋白,核蛋白,胞質(zhì)蛋白以及在植物組織中含有的稀有蛋白在內(nèi)的全蛋白。分離得到的蛋白組分可應(yīng)用于SDS-PAGE、Western blot等。每次可以提取100mg植物組織,本試劑盒可以使用50次。
  植物elisa試劑盒注意事項(xiàng):
  1、使用液氮時(shí),請(qǐng)注意戴上防凍手套,避免液氮凍傷。若研磨的組織量較多,可多次加入液氮,保持植物組織處于充分冷凍狀態(tài)時(shí)研磨。
  2、植物細(xì)胞壁的破碎程度會(huì)影響蛋白的抽提效果。故在步驟3中,盡量將植物組織充分研磨粉碎,以破碎細(xì)胞壁,促進(jìn)細(xì)胞蛋白的釋放,同時(shí)盡量不要取植物的唯管組織。
  3、步驟9中冷凍的固體樣品中含有或多或少的植物纖維,在加入適當(dāng)?shù)臉悠肪彌_液對(duì)冷凍干燥固體溶解離心后,會(huì)產(chǎn)生植物纖維沉淀,不影響下游實(shí)驗(yàn)。
  4、用含有SDS,尿素等的樣品緩沖液對(duì)冷凍干燥的樣品進(jìn)行溶解,有助于疏水性蛋白質(zhì)的*溶解。
  5、如果用于2D電泳,可以將蛋白質(zhì)沉淀用酒精:乙醇(1:1VV)對(duì)進(jìn)行震蕩洗滌,可以進(jìn)一步減少沉淀中的鹽和有機(jī)物殘留,或用2D樣品清潔試劑盒(786-124),減少鹽和有機(jī)物殘留,一般情況下沒有必要。
  6、可以采用非干擾型蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒(SK3071)或改良型Lowry法蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒(SK4041)對(duì)提取樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行定量。
  7、對(duì)于SDS-PAGE電泳,可以采用我公司生產(chǎn)的新型快速考馬斯藍(lán)染色液(BSPO15)或新蛋白質(zhì)考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(BSP007)對(duì)膠進(jìn)行染色。
  8、Solution A和SolutionB易揮發(fā),有一定的腐蝕性,刺激性氣味和易燃性,實(shí)驗(yàn)時(shí)避免與皮膚接觸且具有一定的,請(qǐng)戴上一次性手套,在化學(xué)通風(fēng)櫥中進(jìn)行,并注意遠(yuǎn)離明火。
  9、使用后,請(qǐng)立即旋緊瓶蓋,防止溶液揮發(fā)和與空氣的物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
  10、本試劑盒只能夠用于體外實(shí)驗(yàn),不能夠用于臨床、治療和動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)等。
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